Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:36 min. • April 30th, 2023
Para administrar ADN plasmídico directamente en las células renales del ratón, comience colocando un ratón anestesiado en posición lateral. Prepara al ratón quitándole el pelaje dorsal del costado. Localice un sitio de incisión apropiado en el flanco izquierdo, debajo de la caja torácica.
Haga una pequeña hendidura en la piel y las capas musculares subyacentes. A continuación, aplique una presión suave sobre la cavidad abdominal para exponer el riñón a través del sitio de la incisión. Retire parcialmente el tejido graso perinefrítico superpuesto para visualizar la pelvis renal.
Ahora, tome una jeringa que contenga ADN plasmídico en un tampón de administración hidrodinámica. Inserte la aguja directamente en la pelvis renal, una porción triangular dilatada del uréter en el riñón. Inyecte la solución plasmídica rápidamente de modo que el ADN llegue directamente al parénquima renal, la parte funcional del riñón que filtra la sangre.
La entrega rápida de un gran volumen de líquido a través de la pelvis renal genera una alta presión, creando poros transitorios en la membrana plasmática de las células del parénquima renal. Esto facilita la entrada de plásmidos en las células. Eventualment
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