Patología de expansión: un método para la obtención de imágenes ópticas de alta resolución de muestras de tejido clínico

La patología de expansión, o ExPath, es una técnica de preparación de muestras para muestras biológicas, que permite a la microscopía óptica convencional obtener imágenes de estructuras a nanoescala expandiéndolas mediante un sistema de polímeros.

Primero, tome un portaobjetos de muestra de tejido inmunoteñido procesado y cúbralo con una solución de anclaje que contenga grupos reactivos de proteínas y polímeros. El grupo proteico reactivo del reactivo de anclaje se une a las aminas de las biomoléculas dentro de las células.

A continuación, agregue una solución gelificante adecuada sobre la muestra e incube para permitir su difusión dentro del tejido. El grupo polímero-reactivo del reactivo de anclaje se une a los monómeros libres dentro de la solución gelificante, lo que permite que las biomoléculas se anclen al polímero a medida que se polimeriza.

Una vez completada la polimerización de la muestra, cubra el portaobjetos con una solución de proteinasa. Las proteinasas digieren las proteínas citoesqueléticas para eliminar cualquier resistencia estructural, lo que permite que las células se expandan sin romperse. Tras la digestión enzimática, la muestra gelificada se desprende del po