Aspiración de líquido de glomérulos de ratón: un método para aspirar líquido glomerular de ratón mediante micropunción mediada por dos fotones
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 6:43 min. • April 30th, 2023
En el riñón, el glomérulo, un haz de pequeños vasos sanguíneos encerrados en la cápsula de Bowman, inicia la filtración de sangre y expulsa el líquido de desecho al espacio circundante de Bowman. La investigación del contenido del líquido glomerular ayuda a comprender la fisiología renal.
Para aspirar el líquido glomerular, prepare un ratón anestesiado con su riñón exteriorizado quirúrgicamente. Ahora, inyecte un tinte fluorescente de dextrano en los vasos sanguíneos detrás de la órbita del ojo del ratón. Las moléculas fluorescentes de dextrano se mueven a través del torrente sanguíneo y llegan al riñón.
Debido al alto peso molecular del dextrano, el tinte fluorescente se retiene dentro del glomérulo, dándole un color verde. Bajo un microscopio de dos fotones, que permite la visualización de estructuras profundamente asentadas, localice un glomérulo adecuado para obtener un acceso adecuado al líquido glomerular.
A continuación, alinee una punta de micropipeta recubierta de nanopartículas fluorescentes rojas con el eje lateral del riñón. Con un micromanipulador, avance la punta de la pipeta para penetrar en el riñón. A medida que la punta alcanza el glomérulo objetivo, establezca la
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