Aislamiento de linfocitos de un parche de Peyer de ratón

Los parches de Peyer, PP, agregados de tejidos linfoides organizados en la pared del intestino delgado, contienen células inmunitarias que incluyen linfocitos B, linfocitos T, células dendríticas y macrófagos.

Para aislar linfocitos de PP de ratón, comience con un ratón sacrificado. Hacer una incisión en la pared abdominal, exponiendo la cavidad peritoneal. Localiza el ciego. Diseccione la unión ileocecal para separar el ciego del intestino delgado.

Extirpar el mesenterio e incidir el intestino delgado en el duodeno para extirpar el intestino delgado de la cavidad peritoneal. Coloque el intestino delgado en una placa de varios pocillos que contenga medio frío y enjuague para eliminar los residuos.

Coloque el intestino delgado con el lado mesentérico hacia abajo y humedezca con medio para mantener la hidratación de los tejidos. Identifique los PP: agregados blancos multilobulados en el lado antimesentérico de la pared intestinal.

Extirpe cuidadosamente los PP, excluyendo el tejido intestinal circundante. Transfiera a un tubo que contenga medio. Incubar bajo agitación constante. Este paso de agitación separa la mucosidad, los restos celulares y cualquier materia fecal de los PP, mejo