Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica de pelajes leucocitarios humanos

Las células mononucleares de sangre periférica, PBMC, consisten en una población heterogénea de células inmunitarias especializadas, incluidos linfocitos, monocitos y células dendríticas.

Para aislar las PBMC, comience con un tubo que contenga una sangre de capa leucocitaria humana recién obtenida. La sangre de la capa leucocitaria contiene PBMC, junto con granulocitos con núcleos multilobulados, eritrocitos y plaquetas suspendidas en plasma.

Superponga cuidadosamente la suspensión de capa leucocitaria sobre un volumen igual de un medio de gradiente de densidad con una densidad específica deseada que sea óptima para la separación de PBMC.

Durante la centrifugación, los diferentes tipos de células se separan en distintas capas, según las densidades celulares en relación con el medio de gradiente. Además, los polisacáridos en el medio de gradiente de densidad promueven la agregación y sedimentación de eritrocitos.

Los eritrocitos y granulocitos con densidades más altas sedimentan hasta el fondo del tubo, mientras que el plasma, con la densidad más baja, forma la capa superior. Los PBMC, que tienen densidades más bajas que el medio de gradiente de densidad, forman una capa blanca turb