Generación in vitro de células dendríticas plasmocitoides a partir de progenitores linfoides comunes
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:39 min. • July 8th, 2025
Las células dendríticas plasmocitoides, o pDC, son células inmunitarias que responden a la infección produciendo la citocina interferón tipo I.
Para generar pDC in vitro, tome una suspensión de células progenitoras linfoides comunes, o CLP, aisladas de la médula ósea de ratón. Los CLP pueden diferenciarse en linfocitos y células dendríticas.
Agregue la suspensión celular sobre una capa de células alimentadoras (células estromales adherentes) irradiadas con rayos gamma para inhibir la proliferación. Las células alimentadoras proporcionan citocinas y contacto célula-célula necesarios para la diferenciación de los CLP.
Agregue una concentración adecuada de ligando tirosina quinasa 3 similar a Fms, o FL, una citocina bivalente que promueve el desarrollo de pDC, e incube.
Los CLP migran entre las células alimentadoras y proliferan para formar grupos de células, denominadas áreas empedradas.
El FL en el medio se une al receptor Flt3, un receptor de tirosina quinasa, en los CLP. La unión induce la dimerización del receptor y la autofosforilación de los residuos de tirosina en el dominio citoplasmático.
Las proteínas adaptadoras citoplasmáticas se unen a estos residuos y se fosforilan, tra
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