Generación de células dendríticas inmaduras, maduras y tolerogénicas a partir de monocitos

Para provocar una respuesta inmune, las células dendríticas, DC, presentan un antígeno que se muestra con MHC clase II y las moléculas coestimuladoras CD80 y CD86. Según las características de la respuesta inmune, se subdividen en CD inmaduras, maduras y tolerogénicas.

Para generar varios subconjuntos de células dendríticas in vitro, comience con una placa de múltiples pocillos que contenga monocitos humanos, células precursoras inmunes en un medio completo que contenga factores de crecimiento y la citoquina IL-4, una molécula de señalización.

Incube las células durante un período prolongado. Los factores de crecimiento y la IL-4 inducen la proliferación y diferenciación de monocitos en CD inmaduras.

Las CD inmaduras poseen receptores de reconocimiento de patrones, PRR y expresan moléculas coestimuladoras y de clase II de MHC bajas, exhibiendo una capacidad disminuida para provocar una respuesta inmune.

Trate un pozo que contenga CD inmaduras con agentes inmunomoduladores: vitamina D3 y glucocorticoides. Estos agentes inmunomoduladores regulan a la baja la expresión de moléculas coestimuladoras y de clase II del MHC. Esto conduce a la diferenciación en CD tolerogénicas, células inm