Clasificación de células basada en citometría de flujo para diferentes poblaciones de células B circulatorias
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:01 min. • July 8th, 2025
Según sus receptores de superficie celular, las células B circulantes humanas se clasifican como células B vírgenes CD19 positivas, células B de memoria CD19 y CD27 positivas, y células plasmáticas plasmablastos CD19, CD27 y CD38 positivas.
Para clasificar estas poblaciones celulares, tome una suspensión purificada de células B. Incubar con anticuerpos de inmunoglobulina G humana. Los anticuerpos bloquean los receptores Fc de las células B, evitando la unión de anticuerpos inespecíficos.
Agregue anticuerpos marcados con fluorescencia dirigidos a CD19, CD27 y CD38.
Los anticuerpos anti-CD19 se unen a los receptores CD19 que se expresan de forma ubicua en las células B.
Los anticuerpos anti-CD27 se unen a los receptores CD27 expresados en las células B de memoria y las células plasmáticas de plasmablastto.
Los anticuerpos anti-CD38 se unen a los receptores CD38 expresados en las células plasmáticas del plasmablastto.
Agregue un tinte fluorescente de unión al ADN como marcador de células muertas.
Las células muertas exhiben una pérdida de integridad de la membrana, lo que permite la entrada celular del colorante y la unión al ADN bicatenario; las células vivas permanecen sin teñir.
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