Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:06 min. • July 8th, 2025
Para generar emigrantes tímicos derivados de iPSC, iTEs de células T inmaduras en un sistema de cultivo de órganos tímicos 3D, tomar desoxiguanosina, lóbulos tímicos fetales de ratón tratados con dGUO en medios adecuados.
dGUO ingresa al ambiente tímico y destruye los linfocitos tímicos endógenos, evitando su interferencia con las células T inmaduras derivadas de iPSC durante el cocultivo.
Haga una incisión profunda en el centro de cada lóbulo tímico. Transfiera los lóbulos a una placa de cultivo fresca que contenga un medio suplementado con el factor de células madre de factores de crecimiento, el ligando FLT3 y la interleucina-7.
Pipetee el medio que contiene lóbulos tímicos en los pocillos de una placa de cultivo 3D. Agregue células T inmaduras derivadas de iPSC. Incubar. Las células T migran a los lóbulos tímicos a través de la incisión.
Dentro del entorno tímico, los factores de crecimiento FLT3 ligando e IL-7 se unen a sus respectivos receptores en células T inmaduras, lo que conduce a la activación de factores de transcripción y la expresión de genes específicos.
En consecuencia, las células T inmaduras experimentan una serie de cambios y adquieren características específica
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