Reconocimiento de marcadores CD de células asesinas inducidas por citocinas humanas mediante citometría de flujo
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:35 min. • July 8th, 2025
Las células asesinas inducidas por citoquinas, CIK, son poblaciones heterogéneas de células inmunitarias generadas ex vivo a partir de cultivos de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) estimuladas con citocinas específicas y anticuerpos monoclonales. Las células CIK comprenden poblaciones celulares, incluidas las células T NK CD3 + CD56 +, las células T CD3 + CD56 - y las células NK CD3-CD56 +.
Para determinar la proporción de células CIK, comience con tubos que contengan una suspensión de células CIK derivada de PBMC. Agregue anticuerpos anti-CD3 y anti-CD56 conjugados a diferentes fluoróforos y su mezcla a los tubos designados. Agregue anticuerpos de control de isotipo conjugados con fluoróforos similares como anticuerpos específicos en otros tubos.
Los anticuerpos anti-CD3 y anti-CD56 marcados con fluorescencia reconocen y se unen a CD3 y CD56 expresados en poblaciones de células CIK, respectivamente. Los anticuerpos de control de isotipos carecen de especificidad del antígeno diana, lo que facilita las mediciones de señales de fondo no específicas.
Pipetee las células en tubos de fondo redondo con tapas de filtro celular, que ayudan a eliminar los agregados celulare
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