Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:58 min. • July 8th, 2025
Después de la lesión vascular, las plaquetas se reclutan y activan en el sitio de la lesión para formar un tapón de plaquetas e iniciar la reparación del tejido.
Para purificar las plaquetas de la sangre entera murina y activarlas in vitro, tome un medio de gradiente de densidad adecuado. Coloque con cuidado la muestra de sangre sobre el medio. Centrifugar para separar las plaquetas del plasma y las capas de glóbulos rojos y blancos.
Transfiera las plaquetas a dos tubos nuevos que contengan un tampón de tinción adecuado. Agregue el tetrapéptido GPRP sintético que contiene la secuencia de aminoácidos glicina-prolina-arginina-prolina a un tubo, seguido de trombina.
La trombina escinde dominios extracelulares específicos de los receptores de trombina de la superficie plaquetaria, iniciando una cascada de señalización aguas abajo y activando las plaquetas. Los gránulos de las plaquetas activadas liberan la proteína CD62P, que se transloca rápidamente a la superficie de la membrana.
El tetrapéptido GPRP bloquea el fibrinógeno, una glicoproteína que se une a la integrina CD41 / CD61 que abarca la membrana en las plaquetas activadas para iniciar la agregación plaquetaria, manteniendo así
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