Aislamiento de células de Sertoli inmunorreguladoras de túbulos seminíferos de ratón

Los túbulos seminíferos de los testículos contienen células de Sertoli, que nutren las células germinales. Las células de Sertoli están conectadas a través de uniones estrechas y están firmemente unidas a la matriz basal rica en ácido hialurónico. Esta disposición de las células de Sertoli regula la entrada de células inmunitarias en el túbulo y protege a las células germinales en desarrollo de la degradación.

Para aislar las células de Sertoli, comience con un tubo que contenga túbulos seminíferos parcialmente digeridos derivados de testículos de ratón. Estos túbulos carecen de células peritubulares, células de músculo liso que rodean los túbulos seminíferos.

Trate los túbulos con un cóctel de enzimas que contenga hialuronidasa, esencial para la hidrólisis del ácido hialurónico, y ADNasa.

Las hialuronidasas ingresan a los túbulos y escinden el ácido hialurónico, un polisacárido basal, iniciando el desprendimiento de células de Sertoli de la matriz basal y liberando células germinales en la solución. La DNasa digiere cualquier contaminante de ADN de la solución, evitando la agregación celular.

Lave los túbulos digeridos enzimáticamente con un tampón, eliminando las enzimas residual