Aislamiento selectivo de células T CD4⁺ Vδ1⁺ γδ de células mononucleares de sangre periférica humana

Las células T γδ expresan receptores de células T, TCR, que comprenden cadenas gamma y delta con dominios variables y constantes.

Las células T CD4+ Vδ1+, una subpoblación de células T γδ, coexpresan la cadena variable Vδ1 y el correceptor CD4. Estas células migran a los tejidos inflamados y se transdiferencian en células T αβ CD4+ o CD8+ funcionalmente maduras, mediando una respuesta inmunitaria.

Para aislar las células T CD4+ Vδ1+ de las células mononucleares de sangre periférica humana, PBMC, resuspender las células en un tampón. Utilice un reactivo bloqueador de Fc para bloquear los receptores Fc de la superficie celular y evitar la unión de anticuerpos no específicos.

Agregue anticuerpos anti-Vδ1 conjugados con el fluoróforo FITC, que se unen a los antígenos Vδ1 de las células T γδ. Incubar con microperlas magnéticas acopladas a anticuerpos anti-FITC, que se adhieren al colorante FITC en los anticuerpos unidos a células T Vδ1.

Pase la mezcla a través de una columna magnética para atraer las células T Vδ1+ unidas a perlas; las células T Vδ1- permanecen libres y posteriormente se eliminan. Enjuague con fuerza la columna empujando el tampón a través de ella para separar las célul