Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:50 min. • July 8th, 2025
Las micropartículas celulares son vesículas unidas a la membrana de tamaño submicrónico que encierran biomoléculas liberadas de la membrana plasmática de las células eucariotas que sufren apoptosis.
Para generar micropartículas derivadas de linfocitos T, los LMP in vitro, tome un matraz de cultivo que contenga cultivo de linfocitos T. Agregue actinomicina-D, un antibiótico. Incubar durante un tiempo adecuado.
La actinomicina-D ingresa a los linfocitos y se transloca al núcleo. Se intercala entre pares de bases de ADN específicos, inhibiendo la transcripción. Esto conduce a la detención del ciclo celular y activa la vía apoptótica.
Al inicio de la apoptosis, la caspasa-3 activada escinde y activa la quinasa asociada a rho, ROCK1. ROCK1, a su vez, fosforila sus proteínas diana aguas abajo, lo que provoca la contracción de la actomiosina, lo que provoca la formación de ampollas en la membrana y la posterior liberación de LMP que contienen los componentes citosólicos y nucleares en el medio.
Las células eventualmente sufren apoptosis.
Después de la incubación, transfiera el medio de cultivo a un tubo nuevo. Centrifugar para granular los linfocitos T. Transfiera el sobrenadante a un tub
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