Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 7:01 min. • July 8th, 2025
El factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos, GM-CSF, es secretado por células T auxiliares productoras de GM-CSF o células THGM. Estas células muestran una baja expresión de otras citocinas específicas de células T auxiliares.
Para comenzar la diferenciación in vitro de las células THGM, tome una suspensión de células T auxiliares, aislada del bazo del ratón, que contiene células maduras activadas por antígeno y células vírgenes indiferenciadas.
Agregue anticuerpos marcados con fluorescencia dirigidos a marcadores de superficie característicos de las células vírgenes y maduras. Realice la clasificación de células activadas por fluorescencia para aislar las células T vírgenes.
Coloque las células en un pozo recubierto con anticuerpos que se unen al complejo receptor de células T. Agregue un anticuerpo que se una al receptor coestimulador. La unión sinérgica activa las células.
Agregue interleucina 7, una citocina, que induce la diferenciación en células THGM y la producción de GM-CSF. Agregue acetato de miristato de forbol, PMA, un compuesto proinflamatorio, ionomicina, un ionóforo de calcio y un inhibidor del transporte de proteínas.
La PMA ingresa a la célula y
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