Efecto del anticuerpo anti C-fms sobre la osteoclastogénesis en células de médula ósea de ratón in vitro
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:27 min. • July 8th, 2025
La osteoclastogénesis es el proceso por el cual los precursores de osteoclastos se diferencian y fusionan para formar osteoclastos multinucleados.
Para estudiar el efecto del anticuerpo anti-c-fms sobre la osteoclastogénesis in vitro, tome una placa de cultivo que contenga una suspensión de células de médula ósea de ratón. Agregue el factor estimulante de colonias de macrófagos, M-CSF.
En cultivo, M-CSF se une a su receptor específico, c-fms, en células precursoras mieloides, activando vías de señalización y causando diferenciación en macrófagos de médula ósea, BMM, que representan precursores de osteoclastos y se adhieren a la placa.
Retire las células no adherentes. Coseche los BMM y siembre en pozos de placas de pocillos múltiples. Suplemento con M-CSF y activador del receptor del ligando del factor nuclear kappa-Β, RANKL.
Agregue concentraciones crecientes de anticuerpos anti-c-fms a los pocillos.
En el pocillo de control, M-CSF se une a los receptores c-fms y activa las vías de señalización, estimulando la expresión del receptor RANK y promoviendo la supervivencia y proliferación de BMM. RANKL se une a los receptores RANK, desencadenando una cascada de señalización y provocand
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