Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:50 min. • July 8th, 2025
El sulfato de sodio de dextrano, o DSS, induce la colitis, una enfermedad inflamatoria intestinal, donde la alteración de la barrera epitelial intestinal conduce a la inflamación.
Para evaluar el daño tisular, tome tejido de colon fijo aislado de un modelo murino de colitis inducida por DSS. Sumerja el tejido en un medio de inclusión para facilitar el corte y congele rápidamente.
Con un criomicrótomo, obtenga una sección delgada de tejido y recójala en un portaobjetos de vidrio.
Sumerja el portaobjetos en una solución que contenga un tinte de hematoxilina oxidado unido al mordiente (un catión metálico) que imparte una carga positiva al tinte. El complejo colorante-mordiente se une al ADN cargado negativamente, tiñendo el núcleo de color púrpura rojizo.
Sumerja el tejido en una solución diferenciadora ácido-alcohol, eliminando el colorante unido no específicamente del citoplasma y la matriz extracelular. Enjuague el tejido en un agente azulado, un medio alcalino, que imparte un color azul a los núcleos, mejorando el contraste.
Sumerja el portaobjetos en concentraciones crecientes de alcohol para deshidratar el tejido mejorando la penetración de la contramancha.
Sumerja el tejido en
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