Un sistema de cultivo de órganos intestinales ex vivo para estudiar las interacciones entre el huésped y la microbiota

Para estudiar las interacciones entre el huésped y la microbiota intestinal ex vivo, comience con un tejido de colon murino libre de bacterias específicas colonizadoras del intestino. Enjuague el tejido con un medio para eliminar las heces y transfiéralo a una placa de pocillos múltiples que contenga un medio adecuado.

Al mismo tiempo, ensamble el dispositivo de cultivo de órganos intestinales ex vivo de múltiples pocillos.

Cada pocillo del dispositivo consta de dos puertos de entrada y salida emparejados: el primero se conecta a la luz del colon y el segundo proporciona un suministro continuo de medio a los pocillos para mantener la viabilidad del tejido.

Transfiera el tejido al dispositivo. Conecte los extremos proximal y distal del colon al primer par de puertos de entrada y salida. Inicie el flujo estimulante luminal hacia la luz del colon y el flujo medio hacia el pozo.

El estimulante contiene bacterias colonizadoras del intestino que secretan enzimas que degradan la capa de moco, lo que les permite adherirse a las células epiteliales subyacentes. Esto activa una cascada de señalización que hace que las células dendríticas residentes extiendan sus dendritas entre las células e