Ensayo para determinar la dosis infecciosa del virus Drosophila C en células de insectos cultivadas

El virus Drosophila C, o DCV, un virus de ARN monocatenario positivo, comúnmente infecta a Drosophila melanogaster.

Durante la infección, el DCV utiliza la maquinaria de la célula huésped para replicar el genoma viral, produciendo finalmente partículas de virus. Las células infectadas exhiben efectos citopáticos, CPE, y se someten a lisis o mueren sin lisis debido a su incapacidad para dividirse.

Para determinar la dosis infecciosa promedio del cultivo de tejido viral, la concentración de DCV a la que la mitad de las células infectadas muestran CPE, comience con suspensiones de DCV diluidas en serie.

Transferencia a una placa de pocillos múltiples que contiene células semiadherentes de Drosophila S2* derivadas de embriones en etapa tardía de Drosophila melanogaster, un huésped natural de DCV. Los pocillos que contienen medio y células sirven como controles negativos.

Incubar para que el virus infecte las células. Las células infectadas por virus muestran CPE a través del daño celular y la muerte. Después de la incubación, observe los pocillos bajo el microscopio.

Identifique pozos positivos y negativos de CPE en todas las diluciones. Utilizar un método adecuado para determinar la d