Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:25 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples que contenga macrófagos.
Agregue Cryptococcus neoformans a los pocillos de prueba, mientras que los pocillos de control contienen solo macrófagos.
Los macrófagos fagocitan hongos dentro de los fagosomas.
Lavar con tampón para eliminar los hongos no fagocitados. Agregue medios libres de antibióticos. Incubar.
El fagosoma se fusiona con el lisosoma, formando un fagolisosoma. Los hongos modulan el pH de los fagolisosomas y poseen mecanismos intrínsecos para sobrevivir a condiciones fagolisosomales adversas. Los hongos permeabilizan la membrana fagolisosomal y se replican, acompañados de una acumulación citosólica de vesículas llenas de polisacáridos.
La residencia y replicación de hongos intracelulares causan daño celular, desencadenando vías de muerte celular. Esto provoca la lisis de macrófagos y la liberación de contenido intracelular, incluida la lactato deshidrogenasa o LDH, en el medio.
Recopile medios que contengan LDH en diferentes puntos de tiempo. Lisar los macrófagos de control en puntos de tiempo similares para obtener la máxima liberación celular de LDH. Agregue la mezcla de ensayo a los medios recolectados y lisados. La LDH convierte
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