Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:43 min. • July 8th, 2025
Tome una cámara de imágenes que contenga un cultivo de células epiteliales humanas cargadas con un indicador fluorescente de calcio intracelular.
Agregue un medio de cultivo que contenga iones de calcio. Introducir Shigella, una bacteria patógena, e incubar.
El sistema de secreción bacteriana penetra en la célula huésped y libera efectores de invasión. La invasión desencadena el reordenamiento de la actina, formando membranas que se agitan alrededor de las bacterias.
En el sitio de invasión, se activa la fosfolipasa C, o PLC, en la membrana plasmática y los receptores de trifosfato de inositol se agrupan en el retículo endoplásmico o RE.
El PLC hidroliza el fosfatidilinositol de membrana 4,5-bisfosfato a trifosfato de inositol, o IP3, que se acumula localmente debido a la densa malla de actina.
IP3 se une a los receptores en el RE, lo que provoca la liberación de calcio. Los indicadores de calcio se unen a los iones liberados y emiten fluorescencia, mostrando una respuesta local de calcio.
IP3 se difunde lentamente a través de la actina, agotando aún más el nivel de calcio del RE y activando un canal de calcio de la membrana plasmática, lo que lleva a la entrada de calcio.
La fluor
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