Una técnica de sonda nasogástrica intragástrica para controlar la infección por Helicobacter en ratones

0 vistas3:04 min • July 8th, 2025

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Para establecer un modelo de infección por Helicobacter pylori, comience con un ratón anestesiado y libre de patógenos. Sujete el mouse firmemente para minimizar el movimiento durante el procedimiento.

Tome una jeringa llena de una suspensión bacteriana. Conecte un catéter de polietileno a la aguja de la jeringa para la sonda intragástrica, una técnica para administrar la suspensión directamente en el estómago.

Inserte el catéter en el centro de la boca abierta para acceder al esófago, un tubo muscular que conecta la boca con el estómago. Guíe suavemente el catéter a través del esófago hasta que llegue al estómago y administre la suspensión bacteriana directamente en su entorno ácido.

Las bacterias inoculadas secretan ureasa, una enzima que convierte la urea en amoníaco y dióxido de carbono. El amoníaco eleva el pH del estómago, neutralizando la acidez y permitiendo que las bacterias sobrevivan.

Estas bacterias utilizan sus flagelos para atravesar la capa protectora de moco, lo que les permite llegar al epitelio gástrico, donde se adhieren a las células utilizando proteínas de adhesina. Al unirse, estas bacterias liberan factores de virulencia que interrumpen las uniones estrechas entre las células epiteliales.

Esta alteración estructural promueve la invasión bacteriana y la colonización en tejidos más profundos, estableciendo finalmente una infección controlada en el estómago.

Agregue suspensiones bacterianas a tubos de poliestireno de 15 mililitros y use un asa de plástico para transferir una gota de 10 a 20 microlitros de cada cultivo a portaobjetos de microscopio de vidrio individuales. Luego, evalúe la viabilidad y motilidad de las bacterias bajo microscopía de contraste de fase con un aumento de 100 veces.

Solo use el inóculo de H. pylori si la mayoría de las bacterias tienen una forma bacilar. Los inóculos de H. felis deben contener principalmente bacterias de forma helicoidal y cargar el inóculo en jeringas desechables individuales de 1 mililitro. Equipe cada jeringa con una aguja de calibre 23 y use una película de parafina plástica para conectar un catéter de polietileno desechable a cada aguja.

A continuación, sujete manualmente a un ratón libre de patógenos específicos y libre de Helicobacter de 6 a 8 semanas de edad por el cuello y la cola e inserte un catéter en el centro de la mandíbula abierta. Guíe el catéter en dirección caudal hacia el esófago, extendiendo el cuello del ratón para permitir un fácil acceso al estómago a través del esófago y lejos de la tráquea hasta que la mayor parte o la totalidad del catéter ya no sea visible y se sienta resistencia. Luego, administre al menos 1 x 10 5 bacterias para garantizar una colonización óptima en la patología de la enfermedad.

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Última actualización: 22 agosto 2026