Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:32 min. • July 8th, 2025
Tome un ratón macho anestesiado e inserte un catéter en sus genitales.
Introducir bacterias uropatógenas en la uretra. Dentro del tracto urinario, la bacteria se adhiere a la célula uroepitelial.
La interacción de las proteínas de la superficie bacteriana con las proteínas de la membrana de la célula huésped induce un reordenamiento citoesquelético que hace que la membrana de la célula huésped se envuelva firmemente alrededor de la bacteria a través de un mecanismo de cremallera.
Posteriormente, la bacteria se internaliza dentro de una vesícula unida a la membrana. Dentro de la vesícula, la bacteria produce monómeros de toxina α-hemolisina que se ensamblan para formar un complejo de poros en la membrana vesicular.
La bacteria escapa a través del complejo de poros hacia el citoplasma de la célula huésped, donde se replica para formar comunidades bacterianas intracelulares, o IBC. Los IBC son estructuras densas, similares a biopelículas, dentro de las células huésped, protegidas del ataque directo de las células inmunitarias presentes en el espacio extracelular.
A medida que las bacterias uropatógenas maduran dentro de los IBC, eventualmente salen de las células huésped para infectar a las células vecinas, causando infecciones del tracto urinario.
Para inocular ratones machos, coloque dos pinzas para el pulgar craneal y caudalmente en los genitales externos del ratón. Retraiga el prepucio para exponer completamente el glande del pene. Luego, una vez que el pene esté colocado externamente, suelte las pinzas para el pulgar. Vuelva a colocar las pinzas para estabilizar el pene que sobresale perpendicular al animal, sosteniendo el órgano suave pero tensamente. Luego, a través de la pequeña abertura en la punta del meato uretral, introduzca con cuidado el catéter y guíelo suavemente hacia el pene con fórceps para mantener suavemente la tensión.
Una vez que el centro del catéter se encuentra con la punta del pene, muy lentamente, dispense 50 microlitros del inóculo manteniendo la posición del pene. Tenga en cuenta la calidad de la instilación de acuerdo con un puntaje de calidad de instilación predeterminado, como el que se muestra aquí. Retraiga el catéter lentamente durante 5 segundos para evitar fugas de inóculo. Coloque al ratón en su jaula en posición supina. El animal debe comenzar a recuperarse de 30 a 45 minutos después de la administración del anestésico.