Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:56 min. • July 8th, 2025
Tome un cultivo de células de cáncer de hígado humano, modificado genéticamente para expresar el polipéptido cotransportador de taurocolato de sodio o NTCP, un receptor transmembrana.
Agregue el virus de la hepatitis B recombinante o VHB. El virus comprende una envoltura externa que contiene proteínas de superficie y una nucleocápside interna que encierra el genoma. La inserción de un gen indicador de luciferasa inhibe la capacidad reproductiva del virus.
La proteína de la envoltura viral se une al receptor NTCP de la célula huésped.
NTCP interactúa con el receptor del factor de crecimiento epidérmico, EGFR, y oligomeriza, induciendo la endocitosis del virus mediada por EGFR.
La envoltura viral se fusiona con la membrana del endosoma para liberar la nucleocápside, que se desmonta en el complejo de poros nucleares.
El genoma viral ingresa al núcleo y se convierte en ADN circular cerrado covalentemente o cccDNA, una plantilla estable, que codifica proteínas virales, incluida la luciferasa.
A intervalos predefinidos, recolecte las células y líselas para liberar luciferasa intracelular.
Introduzca un sustrato reportero. La luciferasa oxida el sustrato, produciendo una señal.
Un aumento
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