Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:29 min. • July 8th, 2025
Comience agregando quimioatrayentes, como una quimiocina, en una placa de pocillos múltiples.
Coloque una cámara permeable transpozo de un tamaño de poro apropiado en el pozo. Agregue suspensión celular asesina natural, o NK, a la cámara superior e incube.
Algunas moléculas de quimiocinas se difunden a través de la membrana y se unen a los receptores de células NK. Esto desencadena vías de señalización que promueven cambios citoesqueléticos, lo que resulta en un movimiento celular direccional hacia la mayor concentración de quimioatrayente en la cámara inferior.
Después de la incubación, transfiera un volumen fijo de células migradas desde la cámara inferior a un tubo de clasificación de células activado por fluorescencia o FACS. Agregue un número predeterminado de perlas de recuento fluorescentes y realice un recuento de células basado en FACS.
Con la siguiente fórmula, determine el número absoluto de células NK migradas en la muestra.
El diagrama de puntos da el número de cuentas de conteo y células separadas como regiones distintas, según sus propiedades de fluorescencia y dispersión.
Para medir la migración de células NK en respuesta a estímulos quimiotácticos, recolecte célula
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