Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:36 min. • July 8th, 2025
La eferocitosis es el proceso por el cual las células fagocíticas eliminan las células apoptóticas.
Para analizar la eferocitosis, obtenga timocitos de ratón susceptibles a la apoptosis. Incubar con colorante CFSE permeable a las células.
Las esterasas intracelulares escinden CFSE a un tinte fluorescente impermeable a las células, tiñendo timocitos. Agregue suero inactivado por calor para evitar manchas excesivas.
Coloque los timocitos teñidos en una placa de cultivo. Agregue estaurosporina, un inhibidor de la proteína quinasa, que interrumpe la cascada de señalización celular crítica, induciendo la apoptosis. Además, los residuos de fosfatidilserina se translocan a la valva externa de la membrana celular, funcionando como "señales de cómeme".
Agregue concentraciones crecientes de timocitos apoptóticos a pocillos de placas de múltiples pocillos que contienen macrófagos peritoneales de ratón activados, que expresan receptores específicos de tirosina quinasas.
Estas quinasas se unen a la fosfatidilserina expuesta en los timocitos apoptóticos, facilitando su internalización por los macrófagos.
Después de la incubación, elimine los timocitos apoptóticos que flotan libremente. Agregue a
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