Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:35 min. • July 8th, 2025
Tome cepas de Staphylococcus aureus virulentas y menos virulentas.
Agregue suero para opsonizar las bacterias.
Transfiera las concentraciones bacterianas crecientes a pocillos de placas de pocillos múltiples refrigerados que contengan neutrófilos. Las bajas temperaturas evitan la activación de neutrófilos.
Centrífuga para facilitar la fagocitosis sincronizada.
Los receptores de neutrófilos se unen a las opsoninas, desencadenando la internalización bacteriana en fagosomas.
En las bacterias virulentas, el ambiente fagosomal desencadena la expresión de toxinas citolíticas.
Estas toxinas forman poros, alterando los fagosomas y comprometiendo la integridad de la membrana de neutrófilos.
Sin embargo, las bacterias menos virulentas exhiben una expresión reducida de toxina citolítica.
Después de la incubación, separe los neutrófilos y transfiéralos a tubos de citómetro de flujo que contengan colorante fluorescente de yoduro de propidio (PI).
El tinte ingresa a los neutrófilos con membranas comprometidas y tiñe el ADN.
Usando un citómetro de flujo, analice los neutrófilos para la tinción de PI.
Un aumento dependiente de la concentración en la proporción de neutrófilos positivos para PI desp
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