Ensayo de infección bacteriana para el estudio de las interacciones anaeróbicas entre bacterias y células huésped

Comience con un cultivo de células endoteliales.

Reemplace el medio con medios anaeróbicos. Incubar en una cámara anaeróbica para equilibrar la temperatura.

Agregue Porphyromonas gingivalis, una bacteria anaeróbica patógena, e incube brevemente.

Las bacterias poseen proyecciones proteicas, conocidas como fimbrias, que se unen a moléculas de adhesión específicas en las células endoteliales, facilitando la adherencia bacteriana.

Esta unión desencadena cascadas de señalización intracelular, lo que resulta en un reordenamiento del citoesqueleto de actina y la internalización bacteriana en fagosomas.

Después de la incubación, retire el medio. Lavar con un tampón anaeróbico para eliminar las bacterias extracelulares no adheridas.

Agregue un detergente suave para permeabilizar las membranas de la célula huésped e inducir la lisis celular, liberando bacterias internalizadas y adheridas a la superficie sin causar daño.

Diluya las bacterias que contienen lisado con medios y prepare diluciones en serie.

Coloque estas diluciones en placas de agar sangre. Incubar en condiciones anaeróbicas para permitir que Porphyromonas gingivalis prolifere y forme colonias.

Después de la incubación, cuente la