Evaluación de Porphyromonas gingivalis internalizado en células endoteliales del huésped

Durante la infección por Porphyromonas gingivalis, las fimbrias de las bacterias anaeróbicas se unen a receptores específicos en las células huésped.

Esta unión inicia cascadas de señalización intracelular, lo que resulta en un reordenamiento de actina e internalización bacteriana dentro de los fagosomas.

Para evaluar la supervivencia de Porphyromonas gingivalis internalizado dentro de las células endoteliales in vitro, tome una placa de pocillos múltiples que contenga células endoteliales adheridas a cubreobjetos.

Agregue la suspensión de Porphyromonas gingivalis. Incubar para facilitar la internalización bacteriana.

Retire los medios y lávelos con un tampón anaeróbico para eliminar las bacterias no internalizadas.

Agregue medios que contengan antibióticos, impermeables a las células endoteliales, para eliminar las bacterias adheridas a la superficie.

Incubar con un tensioactivo suave para lisar las células endoteliales, liberando las bacterias sin provocar su lisis.

Diluir el lisado recogido con medios. Prepare diluciones seriadas del lisado.

Coloque las diluciones en placas de agar sangre. Incubar en condiciones anaeróbicas para que Porphyromonas gingivalis crezca y forme coloni