Un procedimiento de corte de cola de ratón para la recolección de sangre periférica y el aislamiento de plasma

Coloque un ratón dentro de una cámara desinfectada para asegurar el acceso a su cola.

Asegure la cámara para minimizar el movimiento del ratón.

Esterilice la cola y anestestésela.

Con unas tijeras quirúrgicas afiladas, corte una pequeña porción de la punta de la cola del ratón, que contiene una red de vasos sanguíneos.

Este procedimiento de corte de cola permite la recolección de un pequeño volumen de sangre periférica.

Recolecte la sangre en un tubo capilar heparinizado usando la acción capilar del tubo. El tubo heparinizado ayuda a prevenir la coagulación de la sangre.

Con una pera, transfiera la sangre a un tubo recubierto de EDTA.

Invierta el tubo para mezclar correctamente la sangre con EDTA, un anticoagulante. El EDTA se une a los iones de calcio dentro de la sangre, evitando la coagulación.

Centrifugar el tubo para separar el plasma de las células sanguíneas.

Recoja y transfiera la capa superior que contiene plasma a un tubo nuevo.

Almacene el tubo a temperaturas más bajas para mantener la integridad de los componentes del plasma.

Para recolectar una muestra de sangre periférica, primero, coloque suavemente al ratón en un inmovilizador de animales pequeños desinfectado y asegure el tubo para minimizar los movimientos del animal.

A continuación, frote la cola con alcohol isopropílico fresco, seguido de la aplicación de crema anestésica tópica.

Con unas tijeras quirúrgicas muy afiladas, corte entre 0,5 y 1 milímetro de la punta de la cola y recoja aproximadamente 80 microlitros de sangre periférica en tubos capilares heparinizados.

Use una jeringa de pera para transferir las muestras de sangre a un tubo de microtainer de potasio-EDTA marcado e invierta el tubo 20 veces para evitar la coagulación.

Después de centrifugar los tubos de extracción de sangre según las instrucciones del fabricante, recoja cuidadosamente la capa de plasma y almacene las alícuotas a menos 20 grados Celsius, y alícuota el plasma para un almacenamiento de menos 20 grados Celsius.