Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:37 min. • July 8th, 2025
Tome tubos de citómetro que contengan una mezcla de tinción que comprenda anticuerpos monoclonales marcados con fluorescencia suspendidos en un tampón de estimulación.
Agregue concentraciones decrecientes del alérgeno de prueba en varios tubos. Agregue anticuerpos anti-IgE a un tubo para que sirva como control positivo mediado por IgE y agregue tampón a otro tubo para el control negativo.
Pipeta sangre periférica humana en los tubos. Incubar.
Si el individuo está sensibilizado al alérgeno de prueba, esta exposición hace que el alérgeno se una a los anticuerpos IgE específicos del alérgeno unidos a los receptores Fc en la superficie del basófilo.
Los alérgenos reticulan los receptores de Fc unidos a IgE, lo que provoca la activación de los basófilos.
Los basófilos sufren desgranulación, liberando gránulos intracelulares que contienen mediadores inflamatorios, con la regulación positiva de las moléculas CD63 y CD203c.
Los anticuerpos monoclonales marcados con fluorescencia se unen a CD63, CD203c y CCR3 en basófilos, respectivamente.
Baje la temperatura para detener la desgranulación de basófilos.
Agregue tampón para lisar eritrocitos y fijar las células.
Usando un citómetro de flujo,
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