Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:43 min. • July 8th, 2025
Tome un tubo que contenga sangre humana recién extraída y agregue un tampón de lisis.
El detergente en el tampón permeabiliza la membrana celular, lisando las células y liberando ácidos nucleicos intracelulares, o NA, y nucleasas.
Los agentes caotrópicos en el tampón desnaturalizan las nucleasas, evitando la degradación de NA.
Agregue partículas magnéticas de vidrio o MGP (partículas magnéticas recubiertas de sílice) y mezcle bien.
El bajo pH del tampón protona sílice, lo que genera una carga positiva en la superficie de los MGP.
Los NA cargados negativamente se unen electrostáticamente a la superficie cargada, formando un complejo NA-MGP.
Bajo un campo magnético, los complejos NA-MGP se acumulan en el costado del tubo.
Deseche el sobrenadante que contiene restos celulares y proteínas.
Realice múltiples pasos de lavado resuspendiendo los complejos NA-MGP en un tampón de lavado, aplicando un campo magnético para recolectar los complejos y desechando el sobrenadante con los contaminantes restantes.
Vuelva a suspender complejos en un tampón de elución. El pH alto interrumpe la interacción NA-MGP, liberando los NA. Los NA eluidos están listos para los ensayos posteriores.
Para purifica
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