Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:38 min. • July 8th, 2025
Tome una columna de cromatografía de exclusión de tamaño llena de una matriz inerte de partículas de resina de polisacárido. Las partículas porosas tienen un tamaño de poro definido.
Enjuague la columna con un tampón de equilibrio para una purificación óptima.
Agregue un filtrado de cultivo concentrado procesado a partir de un cultivo de Mycobacterium tuberculosis , una bacteria patógena. El filtrado contiene vesículas extracelulares, o EV, y otras proteínas solubles secretadas por las bacterias.
Las VE son estructuras esféricas, pequeñas y de tamaño heterogéneo. Contienen macromoléculas y factores de virulencia encerrados en una bicapa lipídica.
La muestra ingresa a la matriz por gravedad. Agregue el búfer para permitir el movimiento de la muestra a través de la columna.
Los EV no pueden ingresar a la resina debido al pequeño tamaño de los poros y, en cambio, se mueven a través del espacio entre partículas, recorriendo un camino más corto y eluyéndose primero.
Las proteínas, que tienen un tamaño más pequeño, ingresan a los poros, recorren un camino más largo a través de la resina y eluyen al final.
Recopile las fracciones que contienen EV para el análisis posterior.
Permita que la
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos