Una técnica zWEDGI para visualizar larvas de pez cebra infectadas con patógenos fúngicos

Comience con larvas de pez cebra transgénicas que expresan células inmunitarias marcadas con fluorescencia marcadas con marcadores fluorescentes únicos para un seguimiento preciso.

Las larvas se inyectan previamente con proteína fluorescente roja que expresa esporas de Aspergillus, en su rombencéfalo.

Dentro del rombencéfalo, las esporas de hongos imitan la inflamación local y atraen células inmunes, incluidos los macrófagos, que fagocitan las esporas para su eliminación.

Mientras que algunas esporas persisten y germinan en hifas, liberando moléculas derivadas de patógenos y atrayendo neutrófilos al sitio de la infección.

Transfiera una larva anestesiada a la cámara de carga que contiene medio del dispositivo de herida y atrapamiento de pez cebra para crecimiento e imágenes, o zWEDGI, dispositivo interconectado a la cámara de herida a través de un canal de restricción.

Asegure la larva dentro del canal de restricción en una orientación dorsal-lateral para obtener imágenes del rombencéfalo.

En las primeras etapas, la fluorescencia roja representa las esporas de hongos, mientras que la fluorescencia verde confirma el reclutamiento de macrófagos en el sitio de la infección.

Con el tie