Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:54 min. • July 8th, 2025
Comience recubriendo un cubreobjetos con poli-L-lisina biotinilada para crear una superficie rica en biotina.
A continuación, introduzca estreptavidina, una proteína que se une a la biotina, formando un puente molecular para las interacciones posteriores.
A continuación, agregue péptidos fotoenjaulados biotinilados unidos a los principales complejos de histocompatibilidad: pMHC junto con moléculas de adhesión.
Los ligandos pMHC biotinilados y las moléculas de adhesión interactúan con regiones específicas de la estreptavidina, lo que permite su inmovilización.
A continuación, lave el cubreobjetos con solución salina tamponada repetidamente e introduzca las células T.
La presencia de una fotojaula, un grupo químico sensible a la luz atado a un residuo específico en el péptido, obstruye la unión espontánea del receptor de células T al péptido.
Para una activación controlada de las células T, exponga los péptidos fotoenjaulados a la luz ultravioleta.
La luz ultravioleta rompe el enlace químico entre el complejo fotojaula-péptido, exponiendo la forma nativa del péptido.
Los receptores de células T identifican y se unen a los péptidos expuestos, mientras que las integrinas se unen a las
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