Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:33 min. • July 8th, 2025
Para un ensayo de microneutralización, tome una placa de pocillos múltiples que contenga suero humano diluido en serie inactivado por calor con concentraciones decrecientes de anticuerpos neutralizantes específicos de la influenza.
Introducir virus patógenos de la influenza. Los anticuerpos séricos interactúan con los virus y los neutralizan; sin embargo, las diluciones séricas más altas exhiben una neutralización limitada del virus.
Semilla con células de riñón canino Madine-Darby, o células MDCK, que sobreexpresan residuos de ácido siálico humano en su superficie.
En la dilución más alta, los virus de la influenza no neutralizados se fusionan con el ácido siálico de las células, liberando el genoma viral en el citoplasma celular.
Los genes virales se transcriben y traducen a proteínas virales y nucleoproteínas dentro de la célula huésped.
Tratar con una alta concentración de acetona para fijación y permeabilización.
Introducir anticuerpos primarios que interactúan con las nucleoproteínas virales.
Superposición con anticuerpos secundarios conjugados con enzimas que interactúan con anticuerpos primarios. Lavar y tratar con el sustrato de la enzima, produciendo un producto coloreant
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos