Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:03 min. • July 8th, 2025
Comience con una placa de pocillos múltiples que contenga líquido de lavado broncoalveolar de ratón que comprenda una población de células inmunitarias teñida con un colorante de viabilidad fluorescente verde.
Introducir anticuerpos Fc para bloquear los receptores Fc de las células inmunitarias.
Agregue un cóctel de distintos anticuerpos marcados con fluoróforo dirigidos a marcadores celulares específicos. Elimine los anticuerpos no unidos y vuelva a suspender las células en un tampón.
Usando citometría de flujo, identifique singletes de fluorescencia tenue, indicando células vivas.
Ilumina las células a 488 nanómetros, lo que hace que las células emitan fluorescencia roja correlacionada con las células que expresan CD11c.
Dentro de la población alta de CD11c, con filtros de longitud de onda apropiados, identifique las proteínas marcadoras celulares MHC-II en células dendríticas y SiglecF en macrófagos.
En la población baja de CD11c, la expresión de CD3 en las células T y CD19 en las células B permite su identificación.
Ilumina las células a 405 nanómetros, emitiendo fluorescencia azul, lo que significa que los neutrófilos que expresan CD11b.
La iluminación de células a 633 nanómet
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