Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 6:08 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples que contenga micobacterias. Agregue concentraciones crecientes de compuestos de prueba a los pocillos.
incubar. Dependiendo de la acción del compuesto sobre las micobacterias, puede inhibir el crecimiento de micobacterias, mostrando una actividad bacteriostática, o eliminar las micobacterias, demostrando actividad bactericida.
Transfiera las alícuotas de pozo a un ensayo de resazurina de agar de carbón, o CARA, microplaca que contenga agar con carbón activado para absorber el compuesto de prueba, evitando efectos de arrastre.
incubar. La actividad bacteriostática del compuesto inhibe la replicación de las micobacterias, mientras que la actividad bactericida reduce la viabilidad de las micobacterias.
Agregue tampón, resazurina y un surfactante no iónico para dispersar la resazurina en los pocillos.
En las micobacterias metabólicamente activas, las deshidrogenasas reducen la resazurina de color azul y débilmente fluorescente a una resourina fluorescente rosa.
Con un lector de microplacas, mida la fluorescencia de la resorufina en los pocillos.
Los pocillos que carecen de fluorescencia de resorofina indican la actividad bactericida del compuesto.
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