Un ensayo de citólisis in vitro en tiempo real para evaluar la potencia de las células CAR-T

Comience con una placa E que contenga medio de cultivo celular, una placa con microelectrodos de oro en el fondo de cada pocillo.

Siembre la placa con células cancerosas objetivo, adhiriéndose a los microelectrodos de oro, formando una barrera física entre los electrodos.

Transfiera la placa a un analizador de celdas y aplique una señal eléctrica.

Las células adheridas interrumpen el flujo de electrones entre los electrodos, lo que resulta en un flujo de electrones impedido, medido como impedancia.

A medida que estas celdas proliferan y se adhieren a los electrodos, la impedancia eléctrica aumenta proporcionalmente con el número de celdas adheridas, lo que permite la medición en tiempo real.

Introducir células T receptoras de antígeno quimérico o células T CAR que expresan receptores de antígeno quimérico. Estos receptores interactúan con los antígenos de las células cancerosas, activando las células T y formando una sinapsis inmunológica.

Las células T con CAR activadas liberan sustancias citotóxicas, incluidas perforinas y granzimas.

Las perforinas forman poros en la membrana de las células cancerosas, lo que facilita que las granzimas entren en las células e induzcan la citólisi