Ensayo de alteración de hemocitos para evaluar la readhesión de hemocitos a las bolsas hematopoyéticas

Comience con un tubo que contenga perlas de vidrio y larvas de Drosophila de segundo estadio que expresen hemocitos marcados con fluorescencia, células sanguíneas de insectos que comprenden hemocitos circulantes y residentes.

Los hemocitos residentes se adhieren a las bolsas hematopoyéticas, un nicho para la generación de células sanguíneas.

Mecánicamente, perturbar las larvas para liberar hemocitos residentes de las bolsas hematopoyéticas en el sistema circulatorio.

Durante la recuperación, los receptores de los hemocitos residentes interactúan con la bolsa hematopoyética y se vuelven a adherir.

Después de la recuperación, coloque una larva en un portaobjetos de vidrio especializado y cree incisiones en el lado ventral en los extremos anterior y posterior, liberando los hemocitos circulantes.

Lave para eliminar los hemocitos circulatorios restantes; transfiera la misma larva a un pozo nuevo y raspe para desalojar los hemocitos residentes.

Bajo un microscopio de fluorescencia, enumere los hemocitos circulantes y residentes liberados.

A medida que aumenta el tiempo de recuperación después de la perturbación, una disminución de los hemocitos circulantes y un aumento de los hemocitos