Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 5:14 min. • July 8th, 2025
Tome una placa multipocillo que contenga un modelo establecido de infección por Mycobacterium tuberculosis o Mtb.
Los pocillos contienen agregados celulares que comprenden un núcleo de macrófagos necróticos infectados con Mtb y Mtb densamente empaquetados, rodeados de macrófagos no infectados, que imitan la infección in vivo.
Tome una dilución seriada de los antibióticos rifampicina y moxifloxacina.
Deseche los medios de la placa de infección, transfiera las diluciones de antibióticos a los pocillos e incube.
Los antibióticos se difunden a través de los agregados celulares y entran en las células bacterianas.
La rifampicina se une a la ARN polimerasa bacteriana, inhibiendo la síntesis de ARN y causando la muerte bacteriana.
La moxifloxacina se une a la topoisomerasa del ADN bacteriano, inhibiendo la replicación y deteniendo el crecimiento bacteriano. La unión también induce respuestas de estrés, incluida la acumulación de especies reactivas de oxígeno, matando a las bacterias.
Después de la incubación, agregue resazurina, un indicador redox. Dentro de las bacterias vivas y metabólicamente activas, la enzima oxidorreductasa reduce la resazurina azul a resorufina fluorescente rosa.
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