Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 6:23 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples que contenga una monocapa de células de mamíferos.
Inocular los pocillos con diluciones seriadas de homogeneizados de tejido que contienen el virus del Zika, derivado de diferentes órganos de un ratón infectado.
Al ingresar a las células a través de la endocitosis, el virus se multiplica y brota para infectar las células vecinas.
Recubrimiento con una solución de metilcelulosa de alta viscosidad, creando una barrera física que restringe el movimiento del virus.
La barrera solo permite la infección de células vecinas inmediatas, formando focos de células infectadas, y garantiza que cada foco se origine en una sola partícula de virus, lo que permite una cuantificación precisa.
Fije las células y permeabilice la membrana. Agregue anticuerpos primarios que ingresan a las células e interactúan con el antígeno viral.
Introducir un anticuerpo secundario conjugado con peroxidasa que se une al anticuerpo primario.
Agregue un sustrato cromogénico que se convierta en peroxidasa para crear manchas de color, lo que indica los focos de las células infectadas.
Cuente los focos para cuantificar el título del virus en los diferentes órganos del ratón.
Retire las
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