Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:29 min. • July 8th, 2025
Tome dos microplacas que contengan cubreobjetos con macrófagos derivados de la médula ósea o BMM.
Agregue promastigotes metacíclicos de Leishmania, la etapa flagelada alargada, en una placa y amastigotes, la etapa ovalada no flagelada, en otra placa.
Durante la incubación, los parásitos se unen a los receptores de macrófagos, desencadenando la fagocitosis mediada por receptores.
El fagosoma se fusiona con los lisosomas y vesículas derivados del retículo endoplásmico y el aparato de Golgi, madurando en una vacuola parasitófora.
La disminución del pH de la vacuola desencadena la diferenciación del promastigote en amastigote y su replicación.
Lavar para eliminar los parásitos no internalizados.
Fije los macrófagos infectados y agregue detergente para permeabilizar las células y los parásitos.
Introducir un colorante de ácido nucleico fluorescente para teñir los núcleos de macrófagos y parásitos.
Monte los cubreobjetos en portaobjetos y observe bajo un microscopio de fluorescencia, cuantificando los núcleos del huésped más grandes y los núcleos de amastigote más pequeños circundantes.
Compare los números de amastigotes para evaluar su multiplicación dentro de los macrófagos inicialment
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