Tinción inmunohistoquímica para la detección de antígenos del virus de la rabia

Comience con una diapositiva que lleve una sección de tejido cerebral de ratón infectado con el virus de la rabia fijado en formalina e incluida en parafina. La sección fija retiene los antígenos virales a través de la reticulación de proteínas.

Trate el portaobjetos con una solución de xileno para eliminar la parafina.

Sumerja el portaobjetos en concentraciones decrecientes de etanol para rehidratar el tejido, haciéndolo compatible con soluciones acuosas.

Introducir un tampón que contenga proteasa para interrumpir los enlaces cruzados de proteínas, mejorando la accesibilidad al antígeno.

Sumérjase en peróxido de hidrógeno para bloquear las peroxidasas endógenas y aplique una solución de bloqueo para evitar interacciones no específicas.

Introducir anticuerpos primarios específicos para el antígeno de la rabia, formando complejos antígeno-anticuerpo.

Agregue anticuerpos secundarios biotinilados, que se unen a los anticuerpos primarios. Incubar con enzimas peroxidasas conjugadas con estreptavidina, que interactúan con la biotina.

Introducir un sustrato de peroxidasa, produciendo un precipitado rojo magenta.

Contratiña el tejido con una tinción nuclear, seguida de un agente azulado, t