Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:00 min. • July 8th, 2025
Comience con un portaobjetos que contenga secciones de biopsia de arteria temporal fijadas en formalina, desparafinadas y rehidratadas con células inmunitarias infiltradas, incluidos linfocitos y macrófagos.
Los macrófagos activados expresan el receptor de folato beta o FR-β, un marcador relacionado con la enfermedad, que diferencia a los macrófagos de otras células inmunitarias.
Transfiera el portaobjetos a un tampón precalentado para recuperar los receptores de la superficie.
Tratar la sección con peróxido de hidrógeno, bloqueando la actividad de la peroxidasa intracelular.
Introduzca una mezcla de anticuerpos primarios dirigidos a CD3, CD68 y FR-β, que se unen a las células inmunitarias que expresan estas proteínas.
Agregue anticuerpos secundarios biotinilados, interactuando con anticuerpos primarios, y lave.
Recubrimiento con enzimas conjugadas con estreptavidina que se unen a la biotina.
Tratar con un sustrato cromogénico que interactúa con las enzimas, produciendo precipitados marrones localizados.
Introduzca una contratinción: hematoxilina, tiñendo los núcleos de azul.
Identifique microscópicamente las células pequeñas, redondas y teñidas de marrón como linfocitos que expres
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos