Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 4:34 min. • July 8th, 2025
Comience con una placa de pocillos múltiples que contenga una suspensión unicelular de células mieloides de retina de ratón, incluida la microglía, los monocitos y los neutrófilos.
La microglía, o células inmunitarias fagocíticas de la retina, exhibe fluorescencia debido a biopartículas de origen fúngico marcadas con fluoróforo engullidas, preinyectadas por vía intravítrea.
Centrifugar y agregar anticuerpos contra el receptor de Fc, bloqueando sitios de interacción no específicos".
Introduzca un cóctel de anticuerpos marcados con fluoróforo dirigidos a las proteínas de superficie CD11b, Ly6C y Ly6G, interactuando con las células mieloides que las expresan.
Eliminar los anticuerpos no unidos. Tratar con yoduro de propidio, que penetra a través de las membranas dañadas, tiñendo exclusivamente las células muertas.
En citometría de flujo, excitar el yoduro de propidio para excluir las células muertas e identificar las células vivas no fluorescentes.
Ilumine las células con un láser violeta; las células vivas excitadas significan las células mieloides que expresan CD11b.
A continuación, ilumine con un láser rojo, excitando el fluoróforo rojo cercano dentro de las células positivas para
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos