Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:49 min. • July 8th, 2025
Tomemos bicapas lipídicas soportadas por perlas, o BSLB, perlas de sílice recubiertas con bicapas lipídicas conjugadas con complejos péptido-MHC antigénicos, moléculas de adhesión y coestimulación, que actúan como células sintéticas presentadoras de antígenos.
Incubar con células T.
Los TCR se unen a péptidos antigénicos en los BSLB, que, junto con las señales coestimuladoras, forman una sinapsis inmune, activando las células T.
Esta unión desencadena cascadas de señalización intracelular, induciendo el reordenamiento de actina y formando microgrupos en la sinapsis que contienen moléculas de adhesión y señalización.
Las células T liberan vesículas transsinápticas enriquecidas en TCR, moléculas coestimuladoras y contenido de gránulos líticos en la sinapsis, uniéndose a BSLB.
Enfríe gradualmente el cocultivo para separar los BSLB de las células T.
Centrifugar y desechar el sobrenadante. Use un tampón que contenga proteínas para bloquear los sitios de unión libres en las superficies.
Centrifugar y tratar BSLB y células T con anticuerpos conjugados con fluoróforos que se unen a moléculas específicas de señalización y coestimulación.
Mediante citometría de flujo, analice las señales de
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