Un ensayo de unión viral para la detección de compuestos antivirales
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:47 min. • July 8th, 2025
Comience con una placa de pocillos múltiples que contenga una monocapa de células de hepatoma humano preenfriada.
Tratar los pocillos de prueba con una mezcla de virus de la hepatitis C modificado genéticamente que lleva el gen de la luciferasa y un compuesto objetivo; tratar los pocillos de control con el virus solo.
En los pocillos de prueba, las moléculas diana interactúan con las glicoproteínas virales y los receptores de la superficie celular, evitando la unión viral.
Sin embargo, en los pozos de control, las glicoproteínas virales interactúan con los receptores de la superficie celular, lo que permite su unión. Una temperatura baja inhibe la entrada viral.
Retirar el sobrenadante, introducir un medio y volver a incubar a la temperatura óptima, facilitando la entrada del virus.
Al entrar, el virus libera el material genético, iniciando la síntesis de proteínas virales y enzimas luciferasas, que se secretan en el medio.
Transfiera el sobrenadante que contiene luciferasa e introduzca un sustrato.
La interacción enzima-sustrato produce luz en proporción a los niveles de luciferasa.
La menor intensidad de luz en los pocillos de prueba, en comparación con los pocillos de control, i
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