Un ensayo molecular para cuantificar los virus de la influenza A y B
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:49 min. • July 8th, 2025
Tome un sistema de detección molecular que contenga un receptor de muestra precargado, un cartucho de transferencia y una base de prueba.
La base de prueba tiene tubos de reacción que contienen cebadores T1 y T2 con sitios de muesca y regiones de reconocimiento de influenza A y B, una mezcla de enzimas y balizas moleculares con un fluoróforo y un exterminador.
Transfiera las muestras nasofaríngeas que contienen virus en un tampón de lisis desde el receptor de muestras a la base de prueba.
La lisis viral libera ARN, seguida de la unión del cebador T2 a la región diana del ARN y la extensión por transcriptasa inversa.
El otro cebador T2 se une al mismo ARN, desplazando la hebra inicialmente extendida.
El cebador T1 se une a la hebra desplazada y la ADN polimerasa la extiende. Una enzima de muesca corta su sitio, con polimerización y desplazamiento de hebras, formando ADN bicatenario.
El proceso continúa, amplificando dúplex con voladizos monocatenarios.
Las balizas moleculares interactúan con los voladizos, separando el fluoróforo del extintor y produciendo fluorescencia para cuantificar la influenza A y B.
Para comenzar el proceso de prueba, toque Ejecutar prueba en la pantalla del
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