Un ensayo para determinar el inicio de biopelículas polimicrobianas en células infectadas por virus
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:57 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de varios pocillos que contenga monocapas de células de mamíferos.
Semillas de pozos de prueba con el virus del herpes simple. Los pozos de control carecen del virus.
El virus se adhiere al sulfato de heparán de la superficie celular y se internaliza a través de la endocitosis.
La infección por virus desencadena la secreción de heparanasa, que escinde el sulfato de heparán y desenmascara receptores fúngicos específicos.
Co-incubar las células con tubos germinativos de Staphylococcus aureus y Candida albicans.
En las células infectadas por virus, el agotamiento del sulfato de heparán inhibe la interacción bacteriana al tiempo que promueve las interacciones de los receptores fúngicos, evitando la colocalización bacteriano-fúngica.
En las células de control, las bacterias interactúan con el sulfato de heparán, mientras que los hongos se unen a los receptores disponibles.
Esta colocalización microbiana inicia la adherencia, el primer paso en la formación de biopelículas.
Después de la incubación, elimine los microbios no unidos. Cubra con un tampón de lisis, liberando bacterias y hongos en el medio.
Extienda el lisado celular en placas que contengan medios de crecimiento
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